PRESA DE MOSTRES

A HISTOPATOLOGIA , el temps transcorregut des de la mort i l’autòlisi són els principals impediments per a una avaluació correcta de les lesions i la detecció d’agents infecciosos a les cèl·lules entèriques. Per exemple, 20-30 minuts després de la mort hi ha un despreniment difús dels enteròcits de la punta de les vellositats a causa de l’autolisi, que fa impossible el diagnòstic histopatològic d’ETEC i I. suis. A les dues hores postmortem, tot el teixit des del medi fins a la punta de les vellositats es torna eosinofílic sense distinció entre cèl·lules degut a l’autolisi. Com que la majoria de mostres arriben al laboratori l’endemà de la recollida, l’enviament exclusiu de mostres intestinals limitaria significativament, o fins i tot impediria, una avaluació histològica apropiada. Com a conseqüència, és bàsic que, si no enviaràs animals vius al laboratori, recullis les mostres intestinals just després de l’eutanàsia dels garrins. Els fragments d’intestí han de tenir de 2 a 3 cm de longitud i procedir de 2 porcions de l’ili, entre 4 i 5 del dejuni, un del cec, un del còlon proximal i 2 del còlon espiral i estar fixades en formalina (al 10%) en bosses o recipients de plàstic. També s’han d’enviar limfonodes mesentèrics i fragments de fetge . Totes aquestes mostres s’utilitzaran per a examen histopatològic i, en alguns casos, també per a immunohistoquímica (PED, TGE, Rotavirus) o hibridació in situ (ISH).

A més de les mostres fixades en formalina, és important enviar mostres fresques per a bacteriologia, virologia i anàlisis moleculars i biològiques . Els fragments han de ser de 10 a 15 cm de longitud de l’ili i dejuni i les porcions restants del cec i còlon espiral i poden enviar-se en una bossa de plàstic. Els limfonodes mesentèrics i fragments de fetge s’han d’enviar en bosses separades, per evitar contaminacions.

L’avaluació histològica de les seccions intestinals esmentades anteriorment hauria de permetre fitar els possibles agents involucrats en el procés i, en alguns casos, definir la presència d’agents infecciosos. Per exemple, l’atròfia de les vellositats pot estar causada per coccidis (I. suis), Rotavirus, GETv, PEDv, Deltacoronavirus o fins i tot C. perfringens tipus A. Si les mostres pertanyen a garrins de més de cinc o sis dies, podem trobar formes sexuals o asexuals d’I. suis al citoplasma dels enteròcits de l’extrem de les vellositats. Si no es troben coccidis, es pot realitzar immunohistoquímica per detectar la presència d’antígens vírics de Rotavirus o Coronavirus als enteròcits. En gairebé tots els casos d’ETEC, l’examen histològic permetrà la detecció d’una miríada d’organismes cocobacil·lars adherits a la superfície de l’enteròcit a la base oa la paret lateral de les vellositats. C. perfringens tipus C causarà una lesió transmural fibrinonecròtica i hemorràgica de distribució segmentària a l’intestí prim. C. difficile és l’únic agent infecciós que causarà lesions a l’intestí gruixut. L’edema de mesocolon s’observa sovint. Les principals troballes en casos d’infecció per C. difficile són la reducció de les cèl·lules caliciformes i una gran infiltració de neutròfils a la mucosa (del còlon que, en alguns casos, trenquen l’epiteli com una erupció volcànica). C. perfringens tipus A és el més difícil de determinar per histopatologia, ja que pot causar atròfia de les vellositats, però el fet de no trobar aquesta lesió no descarta aquesta possibilitat. (Roberto MC Guedes)